松材线虫鉴定方法中,分子检测技术脱颖而出,其优势在哪?

发表时间:2021-05-17 10:51来源:生兴防治

为防止松材线虫病扩散蔓延,最有效的措施是要及时诊断由松材线虫病引起的松树枯死,并对可能携带松材线虫的松类植物及其产品进行准确的检疫检验,因此,应用快速、准确、灵敏地松材线虫检验检测技术是控制病害扩散的重要手段之一。

过去,为了准确检测松材线虫,不少学者在形态学、遗传学、免疫学、病理学和生物化学等方面做了大量工作,对于松材线虫的检测起到了积极的作用。但是,这些方法在检测过程中由于受到松材线虫生长发育期、虫口数量、实验条件的稳定性等方面的限制,在实际应用过程中具有一定的局限性。


如被认为实用性较强的形态学鉴定,通过显微观察线虫的形态,从雌虫尾尖突、阴门盖,雄虫交合伞等形态特征虽可以基本区分出松材线虫,但形态学鉴定存在较明显的不足。


其一是不利于在实践中进行快速检疫。形态学鉴定对线虫不同虫态有一定要求,局限于成虫不适用于幼虫,如检疫过程还需要人工培养成虫,费时费力,会为快速检疫带来很大困难。


其二是容易造成错检松材线虫与拟松材线虫雌成虫的尾尖突、尾形、雄虫的交合刺形态在种间也有部分重叠现象,检测上容易造成误判、漏判。

随着分子生物学和生物技术的快速发展,应用分子生物学的方法来检测松材线虫,克服了上述方法的不足之处,成为松材线虫检测的重要手段。使用分子生物学手段进行线虫的鉴定,既可以排除其形态学的多样性和不稳定性,区分出不同地域分布和不同类型的虫体,又可以对少至单条的微量线虫做出准确地鉴定。

其中,实时荧光PCR技术作为准确性最高、重现性最好的国际公认的核酸检测方法,成为国家林草局修订的《松材线虫病防治技术方案》中采用的用于判别松材线虫的分子检测方法,已在全国松材线虫防治实践中得到广泛应用。该技术利用荧光信号的积累,实现了对整个PCR过程进行监控。其简便的操作大大降低了交叉污染的可能,对松材线虫幼虫、雌雄成虫或其任意大小片段均可准确检测出来。


生兴防治融合10年松材线虫病科研、防治领域宝贵经验,开发出的松材线虫自动化分子检测系统,采用实时荧光定量PCR技术,系统检测试剂由南京林业大学采集的全国各地区松材线虫、拟松材线虫和其它多种线虫虫株经过大量试验的基础上研发,松木木屑、线虫液都可检测,对线虫液样品快至30分钟,松木木屑样品快至60分钟完成检测全过程


生兴松材线虫分子检测系统已帮助我国20多个省不同地区建立了100多个松材线虫检测中心,成功鉴定可疑松木样品及木质加工品,结果准确率100%。为松材线虫病的早期监测与防控提供有力的技术保障。


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