拟松材线虫的分子检测——松材线虫/拟松材线虫DNA二联检试剂盒

早期研究认为，拟松材线虫致病力弱，属弱寄生类型，只在松树受到恶劣环境影响或其他有害因子的危害造成松树树势衰弱时，起到加速松树枯死的作用。20世纪80年代起，我国陆续发现由拟松材线虫引起的松树萎蔫，且能造成一定的危害。我国拟松材线虫主要分布于上海、江苏、江西、浙江、安徽、辽宁、山东、湖南、广东、四川、贵州、广西、云南等省（区、市）。

近年来有学者研究发现拟松材线虫能携带细菌对云南松产生危害[1],同时不少学者也指出一些拟松材线虫虫株对黄山松、黑松及思茅松、高山松等也有较强致病性。研究表明，拟松材线虫致病性有三类分化：第1类强致病力，致死率大于85%；第2类微弱致病力和潜在致病力，在环境适宜的情况下能够造成严重危害；第3类无致病力。除此之外，调查表明拟松材线虫比松材线虫分布范围更广，在同一地区常常是拟松材线虫先出现，然后才有松材线虫出现。这些现象已引起广泛关注，并逐步加强拟松材线虫研究[2]。

拟松材线虫与松材线虫同属伞滑刃属，在寄主植物、形态、生理生化等方面都极为相似，就单一的形态学鉴定有极大的难度。一些学者甚至提出将两种线虫作为“超级种”或“复合种”的概念。随着松材线虫病的流行，二者相互作用逐步引起人们重视，值得进一步探索和研究。因此对拟松材线虫的识别与鉴定也尤为重要。

南京生兴防治与南京林业大学联合研发松材线虫/拟松材线虫DNA二联检试剂盒，通过特异性引物与探针同目标线虫DNA模板结合后，TaqDNA聚合酶以脱氧核苷酸（dNTP）为底物，对目标线虫基因组特定区域基因进行体外扩增，通过特异性探针水解释放荧光，实时监测PCR反应的进程，可同时检测出松材线虫和拟松材线虫。

该试剂盒依托南京林业大学松材线虫、拟松材线虫基因库，在全国疫区采样与大量试验的基础上进行研发，具有检测结果精准，操作简单，检测速度快等特点，有效解决了实际生产中拟松材线虫的检测难题。

参考资料：

[1] 徐红梅,陈京元,王义勋,等. 拟松材线虫研究进展 [J]. 湖北林业科技, 2015, 44 (06): 40-44.

[2] 李姝江,朱天辉,张兴华. 拟松材线虫携带细菌对云南松的致病性 [J]. 浙江大学学报(农业与生命科学版), 2014, 40 (02): 146-154.